传染性支气管炎病毒导致蛋鸡输卵管发育障碍机制的研究

　　雏鸡感染IBV后,除了引起一定的伤亡外,还可引起一定比例的鸡输卵管永久性的退化,使其成为表面上正常但不产蛋的假产蛋鸡。由于这种鸡群在开产之前从外观发育(如鸡冠、个体大小、耻骨间距大小等)尚无方法辨别,国内外近年来也没有关于假产蛋鸡发病机制的资料报道,因此往往给养鸡生产带来难以估量的经济损失。为探索传染性支气管炎早期感染导致蛋鸡卵巢发育正常,输卵管发育停滞或永久性损伤为特征的“假产蛋鸡”之致病机制,本研究通过人工感染10日龄雏鸡M41和肾型传染性支气管炎病毒,通过透射和扫描电子显微镜观察了感染雏鸡愈后输卵管超微结构发育对已烯雌酚反应性,并利用相对定量RT-PCR技术观察了输卵管雌激素受体和孕激素受体mRNA的表达。并且通过对血清中生长激素、T3、T4水平进行比较,以期为传染性支气管炎病毒致输卵管发育障碍的临床研究提供依据。本试验分为三部分。 1.传染性支气管炎病毒对雏鸡输卵管超微结构发育的影响 试验通过对10日龄雏鸡人工接种两株传染性支气管炎病毒,研究了正常与染病雏鸡愈后输卵管膨大部和壳腺超微结构发育对雌激素处理的反应性。结果显示: 与对照组相比,感染肾型传染性支气管炎病毒的雏鸡壳腺部纤毛严重缺失,蛋白分泌部纤毛也有缺失但不如壳腺部缺失严重;输卵管上皮仍由单层柱状上皮构成;上皮细胞的线粒体退化,高尔基复合体未发育。感染M41传染性支气管炎病毒的雏鸡壳腺部、蛋白分泌部的纤毛也有缺失,但较肾性传染性支气管炎病毒感染雏鸡为轻,输卵管上皮细胞也是由单层柱状上皮细胞组成。激素对照组输卵管上皮细胞是由假复层柱状上皮细胞组成,高尔基体较为发达。结果表明IBV感染可以不同程度的干扰鸡输卵管对已烯雌酚的反应性,从而阻止输卵管的正常发育。 2.雌激素、孕激素受体在雏鸡输卵管蛋白部和壳腺部中的表达 试验采用相对定量RT-PCR检测了正常对照组、已烯雌酚组、接种肾性IBV+已烯雌酚组和接种M41+已烯雌酚组输卵管蛋白部和壳腺部ER和PR mRNA表达。结果显示: (1)输卵管壳腺部,正常对照组和接种已烯雌酚组ER、PR mRNA均有表达,接种已烯雌酚组ER、PR mRNA的表达量较正常对照组变化不大。而接种肾型IBV+已烯雌酚组和接种M41+已烯雌酚组ER、PR mRNA没有表达。 (2)输卵管蛋白部,正常对照组,接种已烯雌酚组,接种肾型IBV+已烯雌酚组和接种M41+已烯雌酚组ER、PR mRNA均有表达,但接种肾型IBV+已烯雌酚组和接种M41+已烯雌酚组ER、PR mRNA的表达量明显少于正常对照组和接种已烯雌酚组,特别是接种M41+已烯雌酚组。接种已烯雌酚组ER、PR mRNA的表达量较正常对照组变化不大。 3.传染性支气管炎病毒对雏鸡内分泌指标的影响 利用放射免疫技术测定鸡血液中生长激素、甲状腺激素的水平,分析传染性支气管炎病毒对雏鸡内分泌指标的影响。结果显示: (1)已烯雌酚组鸡血清中GH的水平(1.1963±0.11098 ng/ml)与正常对照组(0.7040±0.11098 ng/ml)相比明显升高,差异显著(P<0.05)。M41+已烯雌酚组血清中GH的含量(0.6050±0.08282 ng/ml)与已烯雌酚组(1.1963±0.11098 ng/ml)比较明显下降,差异极显著(P<0.01),肾型IBV+已烯雌酚组鸡(0.9470±0.15979ng/ml)较已烯雌酚组有下降趋势,但未达显著水平。 (2)肾型IBV+已烯雌酚组鸡血清中T3的含量(2.6990±0.164224ng/ml)与正常对照组(2.1280±0.14167ng/ml)相比显著升高(P<0.05)。M41+已烯雌酚组血清T3含量(2.4420±0.27866 ng/ml)有升高趋势,但未达显著水平。已烯雌酚组血清T3含量(2.2210±0.14850 ng/ml)与对照组差异不显著。 (3)M41+已烯雌酚组鸡血清中T4的含量(13.5890±1.25027 ng/ml)与对照组(8.0950±1.39337 ng/ml)相比差异极显著(P<0.01)。M41+已烯雌酚组鸡血清中T4的含量(13.5890±1.25027 ng/ml)与已烯雌酚组(9.6130±0.94200 ng/ml)相比差异显著(P<0.05)。肾型IBV+已烯雌酚组鸡血清中T4的含量(12.0920±0.61207ng/ml)虽较对照组、已烯雌酚组有升高趋势,但没有显著差异。 试验表明:IBV可以不同程度的干扰鸡输卵管对雌激素受体和孕激素受体的表达而降低其对已烯雌酚的反应性,从而阻止输卵管的正常发育。雌激素处理可以在一定程度上升高血液生长激素水平;传染性支气管炎病毒的感染对于生长激素的分泌有一定的抑制作用,但对甲状腺素T3、T4的分泌均具有显著的促进作用。提示在IBV感染条件下血清甲状腺素水平升高对于及输卵管的分化与发育作用不大;而生长激素水平对输卵管的发育可能起着与雌激素更为重要的协同作用。