关于石棉肺的研究和诊治进展

　　西药治疗石棉没有什么好办法，但中药往往能收到一些不错的效果：

　　黄根系一种茜草科植物，三角瓣花属，为广西地方区域性中草药。70年 代国内一些单位将其用于矽肺治疗，收到一定效果〔1〕，但未见用于石棉肺的报 道。我们发现黄根具有突出的阻抑温石棉所致的溶血作用〔2〕。本研究从体外和动 物整体实验两方面探讨黄根对温石棉造成的肺泡巨噬细胞(AM)和肺组织损伤的阻抑作用，为 石棉肺的防治寻找有效药物。

　　一、材料与方法

　　(一)材料

　　1.粉尘与悬液制备：四川温石棉，研磨、水选、干燥制备成粉尘并检测分散度(粉尘混悬液 涂于载物玻片，在显微镜下用测微尺测量粉尘粒子的大小，无选择地依次测量200个，按不 同大小档次记录，计算百分数)。体外染尘用粉尘分散度10～100 μm者占45%，动物染尘用 粉尘分散度<10 μm者占75%。体外实验用粉尘分别用培养液或生理盐水配成混悬液，含量为 0.6 mg/ml，并制备经黄根处理的石棉尘悬液(石棉先经含体积分数20%黄根液的生理盐水 处理1 h，洗去药液后配制成混悬液);动物实验用混悬液含量为15 mg/ml。

　　2.黄根药液：广西中医药研究所制药厂提供黄根浸膏粉(黄根经体积分数为60%的乙醇加热回 流提取，滤过，滤液浓缩至稠膏状后干燥而成。经X-荧光自动分析仪测定，内含铝、钾、锰 、锌、硫、铁、钙、磷等多种离子)，经研磨、水泡充分溶解，按以下浓度配制：体外实验 浓度为21 mg/ml;动物实验浓度分别为300、150、75 mg/ml。

　　(二)实验方法

　　1.体外实验：兔AM体外培养。设5个实验组：正常对照组(常规培养)、单纯黄根组(加含体积 分数为10%黄根液的培养液)、黄-石棉组(加经黄根处理的石棉尘悬液，0.3 mg/孔)、 黄-AM组(AM先在含体积分数为10%的黄根培养液中培养2 h，洗去黄根，再加入石棉尘悬 液)、单纯石棉组(加石棉尘悬液，0.3 mg/孔)。各组均设平行孔，共培养21 h。

　　2.动物实验：健康雄性SD大鼠105只，体重(200±20)g(由中国医学科学院实验动物中心提供 )，随机均分为7组(每组15只)：正常对照组，预防治疗300、150、75 mg/ml 3个剂量组(染 尘前1天开始灌胃，给黄根药液，1 ml/次，每周3次，随体重增加按5 ml/kg相应增加药量， 持 续4个月后停药1个月，后继续给药4个月，共9个月);染尘3个月后治疗组(染尘3个月后开始 给药，剂量同预防治疗150 mg/ml剂量组，方式同上，持续6个月，共9个月);染尘3个月组( 染尘不给药，3个月剖检，为3个月后治疗的基础);染尘9个月组(染尘不给药，9个月剖检) 。大鼠染尘均为经气管内一次性注入15 mg/ml温石棉粉尘悬液1 ml。

　　3.观察指标：(1)体外实验：显微镜下计数细胞台盼蓝着色率，光、电镜观察形态， 培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力测定(2,4-二硝基苯肼比色法)。(2)动物实验：大鼠胸膜粘 连检出率、肺组织病理形态观察和肺胶原蛋白含量测定(氯胺T法)。

　　4.统计学处理：实验数据采用方差分析及χ2检验。

　　二、结果

　　(一)体外实验

　　1.光镜下形态特点：单纯黄根组仅部分兔AM细胞变形，但仍透亮、边缘清晰，着色率为2%～ 10%;黄-石棉组与单纯石棉组的细胞聚集、轮廓模糊、不透亮、边缘不整，两组破损状况相 似，着色率为40%～60%;黄-AM组细胞损伤程度明显减轻，大部分仍为完整、透亮、边缘清 晰的细胞，显示活力尚好，着色率亦较低，为30%～40%(图1、图2)。

　　图1 单纯石棉组肺泡巨噬细胞聚集、边缘不整，

　　部分呈碎片状，着色率40%～60%，台盼蓝 ×400

　　图2 黄-AM组大部分肺泡巨噬细胞形态完整、边缘清晰，

　　着色率30%～40%，台盼蓝 ×400

　　2.电镜下形态特点：单纯黄根组兔AM细胞形态基本正常，胞体完整，仅表面突起和皱褶减少 或皱缩;黄-石棉组与单纯石棉组的细胞损伤状况相似，主要是破坏了细胞多皱褶的表面结 构，造成细胞破损;黄-AM组细胞大部分仍保持多皱褶的表面形态特征，甚至吞入粉尘后表 面形态仍基本正常(图3、图4)。

　　图3 直接接触石棉法的肺泡巨噬细胞表面皱褶萎缩，

　　失去巨噬细胞表面特征，呈现明显破裂和缺损 ×25